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Fibronectin双切口酶质粒(h) | sc-400082-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Fibronectin双切口酶质粒(h2) | sc-400082-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FN1 编码纤维连接蛋白(fibronectin),这是一种高分子量的细胞外基质(ECM)糖蛋白,可组装成纤维状网络,并提供整合素(integrin)结合位点,从而协调细胞黏附、铺展与迁移。纤维连接蛋白调控黏着斑及细胞骨架动力学,并与涉及整合素、FAK/Src 信号以及 Rho 家族 GTP 酶的 ECM 重塑通路发生串联,进而塑造机械转导与组织结构。由于其在创伤修复、血管生成以及上皮–间质相互作用中的作用,FN1 常在纤维化、肿瘤相关基质以及炎症性组织重塑等研究背景下被重点关注。纤维连接蛋白沉积的改变及其剪接异构体比例的失衡,与多种疾病模型中细胞侵袭、免疫细胞转运以及器官特异性的基质硬度变化相关。
Fibronectin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FN1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FN1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FN1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FN1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。