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FHOD1双切口酶质粒(h) | sc-404286-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
FHOD1双切口酶质粒(h2) | sc-404286-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FHOD1(formin homology 2 domain containing 1)编码一种与 Diaphanous 相关的 formin 蛋白,可促进肌动蛋白丝的延伸与组织化,支持应力纤维装配、细胞极性建立以及黏附依赖性的迁移。作为 Rho 家族 GTP 酶信号通路下游的效应分子,FHOD1 整合来自细胞骨架重塑通路的信号,以调控细胞收缩性和膜突起的动态变化。FHOD1 活性改变与细胞运动性和侵袭行为的变化相关;而肌动蛋白结构的失衡也使 FHOD1 在肿瘤进展、心血管与纤维化重塑以及神经发育过程等研究中受到关注。其在富含肌动蛋白结构中的定位与功能,使其成为解析机械力转导以及细胞骨架—细胞核耦联机制的一个重要节点。
FHOD1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FHOD1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FHOD1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FHOD1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FHOD1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。