Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
FHL-1 Antibody (H-4): sc-374246. Western blot analysis of FHL-1 expression in Sol8 whole cell lysate (A) and human thyroid (B) and mouse thyroid (C) tissue extracts. Detection reagent used: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
FHL-1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-403541
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- FHL-1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在FHL-1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：FHL-1: sc-374246，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
FHL-1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-403541 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
FHL1 编码四个半 LIM 结构域蛋白 1（four-and-a-half LIM domains protein 1，FHL-1）。FHL-1 是一种仅含 LIM 结构域的衔接/适配蛋白，在横纹肌中富集，可在肌小节（sarcomere）与肌膜致密体（costamere）处作为支架组织多蛋白复合体。FHL-1 通过将结构蛋白与参与肌肉分化和重塑的信号节点相连接，协调细胞骨架的组织、机械信号转导以及转录输出。FHL1 功能异常与遗传性肌病和心肌病相关，其中蛋白–蛋白相互作用的紊乱可破坏肌小节完整性并扰动应激反应通路。除肌肉生物学外，FHL-1 也常被用作研究 LIM 结构域介导的信号复合体组装及基因表达情境依赖性调控的模型。
FHL-1 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中FHL1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对FHL1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏FHL1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使FHL-1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建FHL1缺失的细胞模型，用于FHL-1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 FHL-1 功能至关重要的 FHL1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 FHL1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 FHL-1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 FHL-1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 FHL1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 FHL-1 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 FHL-1 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由FHL1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定FHL1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。