非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ferritin heavy chain双切口酶质粒(h): sc-418152-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ferritin heavy chain 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ferritin heavy chain双切酶质粒（h）和ferritin heavy chain双切酶质粒（h2）编码针对FTH1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ferritin heavy chain: sc-376594，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ferritin heavy chain双切口酶质粒(h) | sc-418152-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ferritin heavy chain双切口酶质粒(h2) | sc-418152-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FTH1 编码人铁蛋白重链（ferritin heavy chain），其作为具有亚铁氧化酶（ferroxidase）活性的亚基，可将 Fe²⁺ 氧化为 Fe³⁺，从而促进铁在铁蛋白壳内被安全储存，并维持细胞内铁稳态。FTH1 通过缓冲细胞内不稳定/游离铁池并限制 Fenton 反应相关化学过程，影响氧化应激反应、线粒体功能，以及铁依赖性的细胞死亡程序（如铁死亡，ferroptosis）。FTH1 的表达受铁响应元件（IRE）/铁调控蛋白（IRP）信号通路调控，并通过 NCOA4 介导的自噬性铁蛋白周转（铁蛋白自噬，ferritinophagy）与铁动员过程相交叉以控制铁的释放与利用。铁蛋白生物学失衡及 FTH1 水平改变常与炎症、神经退行性变、贫血相关状态以及肿瘤相关的代谢重塑有关，因此 FTH1 是研究铁处理机制的一个重要节点。
ferritin heavy chain 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 FTH1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FTH1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏FTH1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了FTH1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。