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FcRn双切口酶质粒(m) | sc-420308-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
FcRn双切口酶质粒(m2) | sc-420308-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Fcgrt 编码新生儿 Fc 受体(FcRn)。FcRn 是一种与 MHC I 类相关的分子,可在 pH 依赖性的条件下结合 IgG 和白蛋白,从而调控它们的细胞内转运以及在全身循环中的半衰期。FcRn 在内体分选与回收通路中发挥重要作用,既能限制溶酶体降解,也支持跨极化上皮与内皮的跨胞转运(transcytosis)。通过这些过程,FcRn 影响体液免疫、抗原处理以及免疫球蛋白在组织中的分布,并与由 IgG 稳态驱动的炎症与自身免疫机制相关。FcRn 活性失衡与 IgG 持续时间改变及免疫复合物生物学异常有关,因此 Fcgrt 是在小鼠模型中研究 Fc 依赖性免疫调控的一个有用靶点。
FcRn 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Fcgrt 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Fcgrt内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Fcgrt的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Fcgrt基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。