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FBXO3慢病毒激活颗粒(m) | sc-425412-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Fbxo3 编码 FBXO3,它是一种 F-box 底物受体,存在于 SCF(SKP1–CUL1–F-box)E3 泛素连接酶复合物中,赋予泛素依赖性蛋白周转以底物特异性。通过对信号中间体进行受调控的降解,FBXO3 能够影响炎症与先天免疫信号传导的动态变化、细胞应激反应以及蛋白质稳态相关通路。SCF 相关 F-box 蛋白活性的改变常与细胞因子信号失调、细胞周期与应激检查点异常,以及与炎症性疾病机制相关的更广泛通路有关。因此,Fbxo3 是在小鼠细胞模型中解析泛素–蛋白酶体系统对信号转导与转录程序调控的一个有用节点。
FBXO3 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Fbxo3 表达。
FBXO3 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Fbxo3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性FBXO3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Fbxo3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。