Date published: 2026-7-25

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FBP1CRISPR激活质粒(m): sc-424568-ACT

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • FBP1 CRISPER激活质粒(m)是一种协同激活介质(SAM)转录激活系统,目的在于特定上调基因表达
  • FBP1 CRISPR 激活质粒 (m)包含三种质量比为1:1:1的质粒:一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),和杀稻瘟素抗性基因;一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白,和潮霉素抗性基因;一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA,和嘌呤霉素抗性基因。
  • 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域,为高效激活基因提供转录因子的招募
  • 由 FBP1 CRISPR 激活质粒 (m) 和 FBP1 CRISPR 激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别针对 Fubp1 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:FBP1: sc-271241,通过WB, IF或者IHC分析
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    FBP1CRISPR激活质粒(m)

    sc-424568-ACT
    20 µg
    CNY2986.00

    FBP1CRISPR激活质粒(m2)

    sc-424568-ACT-2
    20 µg
    CNY2986.00

    小鼠 Fubp1 编码远上游元件结合蛋白 1(FBP1)。FBP1 是一种可结合单链核酸的调控因子,通过识别远上游调控元件并协调转录动态过程,调节转录以及 mRNA 代谢。FBP1 还可通过与启动子相关复合物和 RNA 加工机制相互作用,影响细胞周期进程、应激响应型基因程序以及转录后调控。FUBP1/FBP1 活性失衡与增殖改变及谱系状态调控异常相关,因此可作为研究致癌性转录调控与基因组稳定性的关键机制节点。在小鼠模型体系中,扰动 Fubp1 的表达有助于解析转录因子招募、染色质相关调控,以及将生长信号与基因表达输出相耦联的通路。

    FBP1 CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Fubp1的表达。

    FBP1 CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的Fubp1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。

    在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于Fubp1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性FBP1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的Fubp1位点,并能够研究内源性位点上依赖于FBP1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Fubp1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟FBP1通路恢复的宝贵工具。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。