FBP1CRISPR激活质粒(h): sc-401293-ACT

人类基因 FUBP1 编码远上游元件结合蛋白 1（FBP1）。FBP1 是一种可结合单链核酸的调控因子，通过与启动子相关元件及 RNA 靶标相互作用，调节转录及转录后层面的基因程序。FBP1 最为人所知的是其对 MYC 表达的影响，以及对更广泛基因网络的调控；这些网络共同参与细胞周期进程、增殖与应激适应性反应的调节。通过上述作用，FUBP1 与控制染色质相关转录调控和 RNA 代谢的通路相连接，使其成为研究情境依赖性基因表达的关键节点。在多种与癌症及神经发育相关的情境中，已有报告指出 FUBP1 的活性或剂量发生改变，支持其用于构建肿瘤发生信号传导、分化以及基因组稳定性等机制研究模型。

FBP1 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性FUBP1的表达。

FBP1 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的FUBP1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于FUBP1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性FBP1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的FUBP1位点，并能够研究内源性位点上依赖于FBP1的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在FUBP1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟FBP1通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。