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FBL19慢病毒激活颗粒(h) | sc-407318-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
FBXL19(FBL19)编码一种含 F-box 结构域和富含亮氨酸重复序列的蛋白质,作为 SCF(SKP1–CUL1–F-box)E3 泛素连接酶复合物的底物识别组分,负责将特定蛋白引导至泛素化并进入蛋白酶体降解。通过调控蛋白稳定性,FBXL19 参与细胞周期进程、信号转导以及与染色质相关的过程,从而塑造转录程序。FBXL19 还被发现可通过与染色质及转录机器相互作用,参与 CpG 岛相关基因的调控,将泛素信号与表观遗传调控联系起来。涉及 FBXL19 的泛素介导蛋白稳态与转录调控失衡,与致癌信号、分化及其他疾病相关细胞状态的研究密切相关。
FBL19 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 FBXL19 表达。
FBL19 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在FBXL19转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性FBL19表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 FBXL19 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。