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Fascin 1双切口酶质粒(h) | sc-402535-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Fascin 1双切口酶质粒(h2) | sc-402535-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FSCN1 编码 Fascin 1,这是一种肌动蛋白束化蛋白,可将平行排列的肌动蛋白丝组织成束,从而支撑丝状伪足(filopodia)、片状伪足(lamellipodia)以及细胞迁移与侵袭所需的其他突起结构。Fascin 1 整合来自细胞骨架重塑与黏附信号网络的多种线索,包括小型 Rho GTP 酶下游通路以及黏着斑(focal adhesion)动态相关通路,以协调细胞运动性与膜转运。FSCN1 表达的改变常与上皮–间质转化(EMT)程序、转移潜能以及侵袭性表型的变化相关,见于多种肿瘤背景。在免疫与基质生物学中,FSCN1 也参与与抗原呈递细胞功能和组织重塑相关的细胞骨架结构构建。
Fascin 1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FSCN1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FSCN1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FSCN1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FSCN1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。