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FAM21C慢病毒激活颗粒(h) | sc-404093-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
WASHC2C(FAM21C)编码 WASH 复合体的核心组分之一。该复合体在内体膜上协调肌动蛋白成核,从而调控内体向质膜的回收以及货物分选。通过与 retromer 复合体及 Arp2/3 调控机器的相互作用,FAM21C 有助于维持受体转运、膜重塑和细胞骨架组织——这些过程对细胞迁移和信号输出至关重要。WASH 通路活性受扰与内体-溶酶体稳态缺陷及受体周转改变相关,而这些现象常与癌细胞行为和神经生物学过程有关。因此,FAM21C 是研究内体肌动蛋白动态、细胞表面受体回收以及细胞内运输网络层级调控的有用靶点。
FAM21C 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 WASHC2C 表达。
FAM21C 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在WASHC2C转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性FAM21C表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 WASHC2C 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。