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FADD双切口酶质粒(h) | sc-400580-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
FADD双切口酶质粒(h2) | sc-400580-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FADD(含死亡结构域的Fas相关蛋白)是一种关键衔接蛋白,可将FAS/CD95、TNFRSF10(TRAIL受体)等被激活的死亡受体与起始型半胱天冬酶(caspase)连接起来,通过形成死亡诱导信号复合体(DISC)促使外源性凋亡发生。除凋亡外,FADD还参与与NF-κB和MAPK通路的串扰,并可通过调控RIPK1/RIPK3信号平衡来影响程序性坏死(necroptosis)的调控。FADD表达或信号传导的异常与细胞生存失衡、异常炎症反应及肿瘤发生相关,因此常被视为研究免疫稳态与应激诱导细胞死亡的关键节点。这些功能使FADD成为连接受体信号、蛋白酶激活级联反应以及人类细胞中情境依赖性结局的机制纽带。
FADD 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FADD 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FADD内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FADD的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FADD基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。