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Factor X双切口酶质粒(h) | sc-404175-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Factor X双切口酶质粒(h2) | sc-404175-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 F10 基因编码凝血因子 X,这是一种依赖维生素 K 的丝氨酸蛋白酶酶原,在内源性与外源性凝血级联通路的汇合点经蛋白水解活化为因子 Xa。因子 Xa 在磷脂表面与因子 Va 形成复合物,将凝血酶原转化为凝血酶,从而把止血信号传导与纤维蛋白形成及血小板活化耦联起来。F10 的活性受到内皮与血浆抗凝机制的严格调控,并与蛋白酶激活受体(PAR)信号以及炎症相关的串扰相整合。因子 X 功能的遗传性或获得性扰动与出血表型或凝血调控失衡有关,因此 F10 是研究凝血网络生物学与蛋白酶信号传导的一个有用节点。
Factor X 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 F10 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对F10内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏F10的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了F10基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。