Date published: 2026-7-25

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Factor X双切口酶质粒(h): sc-404175-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • Factor X 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • Factor X双切酶质粒(h)和Factor X双切酶质粒(h2)编码针对F10的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:Factor X: sc-81739,通过WB, IF或者IHC分析
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    Factor X双切口酶质粒(h)

    sc-404175-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    Factor X双切口酶质粒(h2)

    sc-404175-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    人类 F10 基因编码凝血因子 X,这是一种依赖维生素 K 的丝氨酸蛋白酶酶原,在内源性与外源性凝血级联通路的汇合点经蛋白水解活化为因子 Xa。因子 Xa 在磷脂表面与因子 Va 形成复合物,将凝血酶原转化为凝血酶,从而把止血信号传导与纤维蛋白形成及血小板活化耦联起来。F10 的活性受到内皮与血浆抗凝机制的严格调控,并与蛋白酶激活受体(PAR)信号以及炎症相关的串扰相整合。因子 X 功能的遗传性或获得性扰动与出血表型或凝血调控失衡有关,因此 F10 是研究凝血网络生物学与蛋白酶信号传导的一个有用节点。

    Factor X 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 F10 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对F10内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏F10的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了F10基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。