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FAAH双切口酶质粒(h) | sc-402470-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
FAAH双切口酶质粒(h2) | sc-402470-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)是一种与膜相关的丝氨酸水解酶,可通过水解内源性大麻素(如花生四烯乙醇胺/“anandamide”)及相关的 N-酰基乙醇胺来终止其信号传导。通过调控大麻素受体及其他脂质感知通路的配体可用性,FAAH 影响突触传递、神经炎症信号、伤害性感觉处理以及代谢稳态。FAAH 的活性与内质网上脂质介质的周转密切相关,并与更广泛的花生四烯酸与类二十烷酸(eicosanoid)网络相互交织。FAAH 的表达或活性失调已在疼痛生物学、焦虑相关表型、物质使用行为以及炎症或代谢性疾病等研究背景中被广泛探讨,使其成为开展脂质信号机制研究的一个重要节点。
FAAH 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FAAH 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FAAH内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FAAH的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FAAH基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。