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Ets-1双切口酶质粒(m) | sc-423870-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Ets-1双切口酶质粒(m2) | sc-423870-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Ets1 编码 ETS 家族转录因子 Ets-1,这是一种 DNA 结合型调控蛋白,能够整合多种信号输入,从而控制参与细胞分化、增殖与迁移的基因程序。在小鼠细胞中,Ets-1 尤其与免疫细胞的发育和激活密切相关,塑造 MAPK/ERK 通路以及细胞因子驱动信号等下游的转录输出。Ets-1 还可调控与细胞外基质重塑、黏附以及炎症介质相关基因的表达,因此与组织重塑过程存在关联。在多种实验背景下,ETS1 活性失调与免疫反应改变及致癌性的转录网络有关,使其成为开展基因调控机制研究的一个有用节点。
Ets-1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Ets1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ets1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Ets1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Ets1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。