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ERRβ双切口酶质粒(h) | sc-402868-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ERRβ双切口酶质粒(h2) | sc-402868-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ESRRB 编码雌激素相关受体β(ERRβ),这是一种孤儿核受体,可作为序列特异性的转录因子,调控参与细胞身份、分化以及代谢适应的基因程序。ERRβ 通过与雌激素相关反应元件结合,并在共调节因子的协同作用下调节转录,从而参与核受体信号传导,整合来自发育通路和应激反应通路的信号。在人类细胞中,ESRRB 的活性与干细胞样转录网络、谱系决定,以及线粒体与氧化代谢相关程序的调控有关。ESRRB/ERRβ 信号失调已在分化状态改变和增殖表型等情境中得到研究,因此对于在疾病相关细胞模型中开展转录调控机制研究具有重要意义。
ERRβ 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ESRRB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ESRRB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ESRRB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ESRRB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。