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ERM双切口酶质粒(h) | sc-401161-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ERM双切口酶质粒(h2) | sc-401161-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ETV5 编码 ETS 家族转录因子 ERM。ERM 是一种核内 DNA 结合蛋白,调控与细胞命运决定、增殖和迁移相关的基因表达程序。ERM 在受体酪氨酸激酶信号通路下游发挥作用,包括 FGF/MAPK 通路,并通过控制生长与分化相关靶基因的转录,整合发育与组织重塑过程中的信号。ETV5 活性失调已在多种疾病背景中与上皮–间质动态改变、与侵袭相关的转录状态以及谱系可塑性相关,因此是研究转录网络重编程的一个有用节点。作为序列特异性的调控因子,ERM 也可作为便于研究的模型,用于解析 ETS 因子协同作用、增强子使用以及染色质依赖性的转录调控机制。
ERM 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ETV5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ETV5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ETV5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ETV5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。