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ERAP1双切口酶质粒(m) | sc-429840-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ERAP1双切口酶质粒(m2) | sc-429840-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 ERAP1(Erap1)是一种定位于内质网的锌依赖性金属肽酶,可将抗原性肽前体修剪至适合装载到 MHC I 类分子上的最佳长度,从而塑造免疫肽组(immunopeptidome)并影响 CD8+ T 细胞的识别。除抗原加工外,ERAP1 还参与内质网蛋白质质量控制,并可通过其在肽处理与蛋白稳态维持(proteostasis)中的作用影响内质网应激反应。ERAP1 活性差异与免疫失调和炎症表型有关,因此 Erap1 是研究抗原呈递通路和免疫信号网络的有用靶点。在小鼠模型中,扰动 Erap1 有助于对与自身免疫和感染相关过程进行机制研究,但不意味着任何临床结论。
ERAP1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Erap1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Erap1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Erap1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Erap1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。