Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ERAP1 Antibody (B-10): sc-271823. Western blot analysis of ERAP1 expression in untreated HCT-116 (A), chemically-treated HCT-116 (B), HeLa (C) and K-562 (D) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgG2a BP-HRP: sc-542731. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG1 BP-HRP: sc-525408.
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ERAP1双切口酶质粒(h): sc-403804-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ERAP1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ERAP1双切酶质粒（h）和ERAP1双切酶质粒（h2）编码针对ERAP1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ERAP1: sc-271823，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ERAP1双切口酶质粒(h) | sc-403804-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ERAP1双切口酶质粒(h2) | sc-403804-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
内质网氨肽酶1（ERAP1）是一种依赖锌的M1型氨肽酶，可将抗原肽前体修剪至适合装载到MHC I类分子上的最佳长度，从而塑造细胞的免疫肽组并影响CD8+ T细胞的识别。它位于内质网蛋白加工与抗原呈递的交界处，在MHC I通路中作用于蛋白酶体降解及TAP介导的肽转运之后。ERAP1活性的差异会改变肽库的选择与免疫信号阈值，因此与多种炎症性和自身免疫相关情境中的免疫遗传易感性有关，尤其是在与特定HLA I类等位基因协同作用时。ERAP1也因其在内质网应激相关过程及先天免疫调控中的作用而受到研究，在这些过程中，肽的修剪会影响免疫监视。
ERAP1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ERAP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ERAP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ERAP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ERAP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。