Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
EPX CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402513
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EPX CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在EPX基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EPX CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-402513 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
EPX（嗜酸性粒细胞过氧化物酶）编码一种含血红素的颗粒酶，主要在嗜酸性粒细胞中表达。在该细胞内，EPX 可催化依赖卤化物和硫氰酸盐的氧化反应，从而参与抗微生物活性并调控炎症微环境。通过生成反应性氧化物，EPX 与先天免疫效应通路、氧化还原信号传导以及细胞外基质重塑机制相互交叉，进而影响白细胞募集和组织损伤反应。EPX 活性异常及嗜酸性粒细胞脱颗粒与气道和胃肠道疾病中的嗜酸性炎症以及超敏反应有关。因此，EPX 常被用作评估嗜酸性粒细胞激活状态的分子读出指标，也被视为研究氧化应激驱动的损伤与免疫调控的关键功能节点。
EPX CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中EPX基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对EPX基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏EPX开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使EPX蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建EPX缺失的细胞模型，用于EPX信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 EPX 功能至关重要的 EPX 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 EPX 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 EPX CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 EPX CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 EPX 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 EPX HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 EPX HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由EPX同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定EPX靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。