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EpoR双切口酶质粒(h) | sc-400442-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
EpoR双切口酶质粒(h2) | sc-400442-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
EPOR 编码促红细胞生成素受体(EpoR),属于 I 型细胞因子受体,负责在促红细胞生成素刺激下调控红系祖细胞的存活、增殖与分化。配体诱导的受体二聚化会激活 JAK2 及其下游的 STAT5、PI3K–AKT 和 RAS–MAPK 信号通路,从而协调支持红细胞生成与细胞应激反应的转录程序。EPOR 信号失调与红细胞生成异常以及在血液系统及其他情境中的异常生长信号有关,因此是研究细胞因子受体生物学的一个重要节点。EPOR 也常作为模型受体,用于解析受体转运、信号衰减,以及与缺氧和铁稳态通路的串扰。
EpoR 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EPOR 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EPOR内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EPOR的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EPOR基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。