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EPHX2双切口酶质粒(h) | sc-402095-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
sEH双切口酶质粒(h2) | sc-402095-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
EPHX2 编码可溶性环氧化物水解酶(sEH),这是一种双功能酶,可将来源于多不饱和脂肪酸的脂质环氧化物转化为相应的二醇,从而调节环氧二十碳三烯酸(EETs)及相关环氧脂肪酸的平衡。通过这一环氧化物水解步骤,EPHX2 影响二十碳烷酸类(eicosanoid)和氧化脂质(oxylipin)信号通路,这些通路参与调控血管张力、炎症信号传导、氧化应激反应以及细胞代谢。EPHX2 活性及氧化脂质谱的改变与心代谢表型相关,包括高血压、胰岛素抵抗和与动脉粥样硬化相关的过程,也与神经炎症及疼痛相关信号有关。在生物医学研究中,EPHX2 常用于研究脂质介质生物学、内皮与免疫细胞功能,以及将代谢输入与炎症输出相耦联的应激反应通路。
sEH 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EPHX2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EPHX2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EPHX2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EPHX2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。