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ephrin-B2慢病毒激活颗粒(h) | sc-400777-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
EFNB2 编码 ephrin-B2,是 EphB 受体酪氨酸激酶的一种膜锚定型配体,可通过 ephrin 的反向信号(reverse signaling)与 Eph 的正向信号(forward signaling)介导双向的细胞—细胞信号传导。该信号轴通过 Rho 家族 GTP 酶、MAPK/ERK、PI3K/AKT 以及 Src/FAK 等通路,协调细胞骨架重塑、黏附动态变化与定向迁移,从而调控血管新生芽生、动静脉分化决定、神经与心脏形态发生以及组织边界形成。EFNB2–EphB 信号失调与异常血管重塑及微环境中的炎症串扰相关,且常在肿瘤血管生成、与转移相关的侵袭程序以及发育性血管缺陷等背景下被研究。因此,EFNB2 的表达水平与 ephrin-B2 的信号状态常用于内皮生物学、神经血管相互作用及器官发生模型中的分析与表征。
ephrin-B2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 EFNB2 表达。
ephrin-B2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在EFNB2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ephrin-B2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 EFNB2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。