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ENX-2双切口酶质粒(h) | sc-403611-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ENX-2双切口酶质粒(h2) | sc-403611-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
EZH1 编码多梳家族(Polycomb group)组蛋白甲基转移酶 ENX-2。ENX-2 是 PRC2 复合体的催化组分之一,负责沉积 H3K27me3,从而建立并维持转录抑制程序。ENX-2 促进染色质致密化、维持细胞身份并调控发育相关基因表达;它与 PRC2 的核心伙伴协同作用,以调节谱系特异性的转录网络。在人类细胞中,EZH1 的活性与表观遗传重编程、细胞周期控制及分化通路相互交叉,并与 EZH2 互补,共同塑造抑制性染色质景观。PRC2/EZH1 介导的沉默失调以及 H3K27 甲基化状态改变,与致癌性转录重编程及其他与表观遗传异常调控相关的疾病有关。
ENX-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EZH1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EZH1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EZH1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EZH1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。