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ENSA双切口酶质粒(h) | sc-403380-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ENSA双切口酶质粒(h2) | sc-403380-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ENSA(endosulfine alpha)是一种小型且高度保守的磷蛋白,可调节丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶的活性,尤其是通过抑制 PP2A-B55 复合物来发挥作用。通过这种调控,ENSA 参与细胞周期时序控制、有丝分裂进入/退出,以及对协调细胞增殖与细胞应激反应的信号节点进行磷酸化依赖性调控。ENSA 处于与 CDK 活性和检查点控制相关的激酶–磷酸酶回路之中,因此在研究有丝分裂的准确性与信号传导的稳健性方面具有重要意义。涉及 PP2A 调控的磷酸化网络异常常见于癌症与神经退行性疾病相关研究中,这使得 ENSA 成为进行机制性通路解析的有用靶点。
ENSA 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ENSA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ENSA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ENSA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ENSA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。