Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
endobrevin Antibody (G-12): sc-166820. Western blot analysis of endobrevin expression in HeLa (A) and HEK293 (B) whole cell lysates and human tonsil tissue extract (C).
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endobrevin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-403438
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- endobrevin CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在endobrevin基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：endobrevin: sc-166820，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
endobrevin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-403438 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
VAMP8 编码内膜泡蛋白 endobrevin，这是一种囊泡相关的 SNARE 蛋白，介导对受调控胞吐和内吞转运至关重要的膜融合事件。它与伴侣语法蛋白（syntaxin）和 SNAP 蛋白共同参与 SNARE 复合体的组装，从而驱动囊泡对接与融合，支持诸如分泌颗粒释放、吞噬体–溶酶体融合以及向晚期内体/溶酶体的运输等过程。在免疫与上皮相关情境中，依赖 VAMP8 的囊泡动态会影响与炎性小体相关的分泌以及黏膜屏障功能，因此其失调与炎症表型和改变的宿主–病原体反应相关。endobrevin 功能的扰动还可重塑受体回收与降解通路，使其与信号衰减、抗原加工和细胞应激反应等研究方向密切相关。
endobrevin CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中VAMP8基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对VAMP8基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏VAMP8开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使endobrevin蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建VAMP8缺失的细胞模型，用于endobrevin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 endobrevin 功能至关重要的 VAMP8 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 VAMP8 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 endobrevin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 endobrevin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 VAMP8 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 endobrevin HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 endobrevin HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由VAMP8同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定VAMP8靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。