Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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eIF5双切口酶质粒(h): sc-402133-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- eIF5 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- eIF5双切酶质粒（h）和eIF5双切酶质粒（h2）编码针对EIF5的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：eIF5: sc-28309，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
eIF5双切口酶质粒(h) | sc-402133-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
eIF5双切口酶质粒(h2) | sc-402133-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
EIF5 编码真核翻译起始因子 5（eIF5）。eIF5 是翻译起始过程的核心调控因子，作为 eIF2 的 GTP 酶激活蛋白（GAP），促进起始密码子识别并推动功能性 80S 核糖体的组装。通过调控 eIF2–GTP 水解以及扫描过程的准确性（保真度），eIF5 有助于将全局蛋白质合成与细胞应激反应和生长控制相协调，并与 eIF2 信号通路和整合应激反应（ISR）等途径发生交叉。涉及 eIF5 的翻译调控异常与增殖失衡和蛋白稳态（proteostasis）紊乱有关，使 EIF5 成为研究起始因子动态如何影响致癌程序与应激适应程序的一个重要节点。在人细胞中，扰动 EIF5 可揭示翻译重编程、特定 mRNA 的起始依赖性以及应激颗粒生物学方面的依赖关系。
eIF5 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 EIF5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EIF5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏EIF5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了EIF5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。