Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
eIF4AI双切口酶质粒(h): sc-402623-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- eIF4AI 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- eIF4AI双切酶质粒（h）和eIF4AI双切酶质粒（h2）编码针对EIF4A1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
eIF4AI双切口酶质粒(h) | sc-402623-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
eIF4AI双切口酶质粒(h2) | sc-402623-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
EIF4A1 编码人类 eIF4AI DEAD-box RNA 解旋酶，是 eIF4F 翻译起始复合体的核心组分之一，负责解开具有复杂二级结构的 5′ UTR，从而使 43S 预起始复合体能够进行扫描并识别起始密码子。通过调控帽依赖性 mRNA 翻译，eIF4AI 影响蛋白稳态、细胞周期推进以及应激适应程序，并与调节翻译起始的信号枢纽相整合，例如 mTOR/4E-BP 与 MAPK 通路。EIF4A1 活性改变以及对 eIF4A 驱动翻译的依赖性，常在生长与存活失衡的情境中被研究，包括致癌性转录程序与应激反应等。EIF4A1 也常被用作机制切入点，用于研究翻译重编程、RNA 解旋酶功能，以及对复杂 mRNA 亚群的选择性翻译。
eIF4AI 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 EIF4A1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EIF4A1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏EIF4A1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了EIF4A1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。