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EGFL6慢病毒激活颗粒(h) | sc-411850-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
EGFL6慢病毒激活颗粒(h2) | sc-411850-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
EGFL6 编码一种与细胞外基质相关的分泌蛋白,属于 EGF 样蛋白家族,可促进细胞—基质相互作用及微环境信号传递。研究表明,EGFL6 与内皮细胞和上皮细胞行为的调控有关,包括迁移、黏附与存活,这与其在组织重塑及血管生成相关过程中的作用相一致。通过其 EGF 样结构域,EGFL6 可调节与整合素介导通路以及生长因子应答程序相交汇的信号网络,从而影响细胞骨架动态。多种疾病背景下均有 EGFL6 表达失调的报道,这支持将其作为分子切入点,用于在人源模型系统中研究血管重塑、肿瘤微环境生物学以及细胞运动表型。
EGFL6 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 EGFL6 表达。
EGFL6 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在EGFL6转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性EGFL6表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 EGFL6 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。