Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
EFP Antibody (E-4): sc-166926. Western blot analysis of EFP expression in HeLa (A), TT (B) and I-11.15 (C) whole cell lysates.
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EFP双切口酶质粒(m): sc-432163-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EFP 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- EFP双切酶质粒（m）和EFP双切酶质粒（m2）编码针对Trim25的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EFP: sc-166926，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EFP双切口酶质粒(m) | sc-432163-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
EFP双切口酶质粒(m2) | sc-432163-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Trim25 编码 EFP（TRIM25），这是一种 RING 型 E3 泛素连接酶，可通过依赖泛素的翻译后修饰来调控蛋白质稳定性与信号传导。EFP 通过调节模式识别受体信号以及干扰素刺激反应，参与先天免疫与炎症通路；同时，它还可通过与 RNA 结合蛋白相互作用影响 RNA 代谢。除抗病毒防御外，TRIM25 也与细胞周期和应激反应的调控有关，因此适用于研究情境依赖性的转录程序与蛋白质稳态（proteostasis）控制。TRIM25 活性及其相关泛素化网络的异常与免疫失调和肿瘤相关表型有关，这也支持将其作为通路中心研究中的关键机制节点。
EFP 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Trim25 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Trim25内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Trim25的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Trim25基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。