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EED双切口酶质粒(h) | sc-401234-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
EED双切口酶质粒(h2) | sc-401234-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
EED 编码多梳抑制复合体 2(PRC2)的核心组分之一,可结合三甲基化的组蛋白 H3 第 27 位赖氨酸(H3K27me3),并通过变构作用增强 EZH2/EZH1 甲基转移酶活性,从而扩展抑制性染色质结构域。通过 PRC2 依赖的基因沉默,EED 参与维持细胞身份、控制发育相关的转录程序,并调控细胞增殖与分化。EED 的扰动会破坏表观遗传抑制,进而改变调控谱系承诺与染色质组织的相关通路。PRC2/EED 功能失调与多种癌症及发育性疾病有关,因此 EED 常作为研究表观遗传调控与转录抑制的重要靶点。
EED 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EED 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EED内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EED的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EED基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。