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ECM1双切口酶质粒(h) | sc-404321-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ECM1双切口酶质粒(h2) | sc-404321-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ECM1(细胞外基质蛋白1)是一种分泌型糖蛋白,富集于与基底膜相关的细胞外基质中,并被认为可通过与细胞外基质(ECM)的结构性与信号性组分相互作用来组织组织结构。它参与调控细胞–基质黏附、细胞外基质重塑,以及影响上皮稳态与血管生成过程的微环境信号。ECM1表达的改变与基质信号失衡及皮肤、黏膜和其他组织的病理变化相关,因此是研究细胞外信号网络机制的重要对象。作为一种基质相关因子,ECM1常在类纤维化重塑、炎症相关的组织改变以及肿瘤微环境生物学等背景下被研究。
ECM1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ECM1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ECM1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ECM1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ECM1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。