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ECE-1双切口酶质粒(h) | sc-402379-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ECE-1双切口酶质粒(h2) | sc-402379-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ECE1 编码内皮素转化酶 1(ECE-1),这是一种膜结合的锌依赖性金属蛋白酶,可切割大内皮素(big endothelins)生成具有生物活性的内皮素肽,从而调控内皮素受体的信号传导。通过调节内皮素介导的血管收缩、内皮功能以及平滑肌张力,ECE-1 参与控制血管稳态与炎症反应的相关通路。ECE-1 还参与分泌系统与内体系统中的细胞外肽加工过程,影响局部肽类的可用性及受体激活的动态变化。在多种模型系统中,ECE1 活性或表达的改变与心血管和肺血管重塑表型、肾脏与代谢失衡,以及肿瘤相关微环境信号等现象有关联。
ECE-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ECE1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ECE1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ECE1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ECE1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。