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EBF1双切口酶质粒(h) | sc-401258-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
EBF1双切口酶质粒(h2) | sc-401258-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
早期 B 细胞因子 1(EBF1)是一种序列特异性的转录因子,负责对谱系承诺与分化进行编程,在 B 细胞发育以及调控参与抗原受体信号传导、细胞周期控制和染色质可及性的相关基因方面发挥核心作用。EBF1 与其他造血调控因子协同,建立调控祖细胞成熟与维持细胞身份的转录网络。EBF1 的表达或功能失调与免疫细胞分化异常相关,并常在血液系统恶性肿瘤生物学与免疫系统发育研究中被重点关注。作为一种核内调控因子,EBF1 为解析增强子–启动子调控以及在淋巴与非淋巴细胞背景下的转录回路提供了机制层面的切入点。
EBF1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EBF1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EBF1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EBF1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EBF1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。