Date published: 2026-7-25

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EAR2双切口酶质粒(h): sc-404509-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • EAR2 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • EAR2双切酶质粒(h)和EAR2双切酶质粒(h2)编码针对NR2F6的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    产品名称产品编号规格价格数量收藏夹

    EAR2双切口酶质粒(h)

    sc-404509-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    EAR2双切口酶质粒(h2)

    sc-404509-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    NR2F6(EAR2)编码一种孤儿核受体,作为序列特异性的转录因子发挥作用,将非配体依赖的核受体信号传导与依赖染色质的基因调控连接起来。EAR2 可调控参与免疫稳态、炎症信号以及细胞命运决定的转录程序,并通过占据启动子/增强子以及招募共调节因子,与细胞因子驱动的 JAK/STAT 通路和 NF-κB 调控的基因网络等发生交叉。在人类细胞中,NR2F6 活性改变与 T 细胞反应失调以及更广泛的免疫肿瘤学与炎症性疾病生物学相关,因此适用于研究情境依赖性的转录抑制/激活。NR2F6 也常被用作解析核受体串扰的关键节点,并用于鉴定控制谱系特异性基因表达的调控元件。

    EAR2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NR2F6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NR2F6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NR2F6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NR2F6基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。