Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
E2F-1 siRNA (h): sc-29297. Western blot analysis of E2F-1 expression in non-transfected control (A) and E2F-1 siRNA transfected (B) HeLa cells. Blot probed with E2F-1 Antibody (KH95): sc-251. Actin (I-19): sc-1616 used as specificity and loading control.
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E2F1双切口酶质粒(h): sc-400123-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- E2F1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- E2F1双切酶质粒（h）和E2F1双切酶质粒（h2）编码针对E2F1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：E2F1: sc-251，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
E2F1双切口酶质粒(h) | sc-400123-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
E2F1双切口酶质粒(h2) | sc-400123-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
E2F1 编码一种序列特异性的转录因子，它通过激活 G1/S 转换和 DNA 复制所必需的基因，将促有丝分裂信号与细胞周期进程相整合。E2F1 的活性受 RB1 通路和细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）信号的严格调控，并参与多种检查点，以协调细胞增殖与凋亡及 DNA 损伤应答。E2F1 信号失调常与异常的细胞周期控制和基因组不稳定性相关，因此在研究致癌转化、复制压力以及肿瘤抑制网络时具有重要意义。作为 RB/E2F 以及与 p53 相关的应激通路的下游效应因子，E2F1 常被用于探究增殖的转录调控及细胞命运决定机制。
E2F1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 E2F1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对E2F1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏E2F1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了E2F1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。