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E-FABP双切口酶质粒(h) | sc-418529-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
E-FABP双切口酶质粒(h2) | sc-418529-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
脂肪酸结合蛋白5(FABP5),又称表皮型FABP(E-FABP),是一种位于细胞质内的脂质伴侣蛋白,能够结合长链脂肪酸及其他疏水性配体,从而协调细胞内的转运、储存与利用。通过调控脂质的可用性,E-FABP影响膜结构重塑、氧化代谢以及脂质介导的信号传导程序,包括PPAR调控的转录网络。FABP5的活性与细胞分化和炎症反应相关,体现了其在表皮生物学与免疫细胞功能中的作用。在癌症、皮肤疾病及炎症性疾病模型中观察到的代谢重编程与信号状态改变背景下,FABP5表达失调常被作为研究重点。
E-FABP 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FABP5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FABP5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FABP5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FABP5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。