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Dyrk1A双切口酶质粒(h) | sc-401928-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Dyrk1A双切口酶质粒(h2) | sc-401928-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
DYRK1A 编码双特异性酪氨酸磷酸化调控激酶 1A(Dyrk1A),这是一种可发生自磷酸化的丝氨酸/苏氨酸激酶,能够调控控制细胞周期进程、神经元分化以及蛋白稳定性的磷酸化网络。Dyrk1A 通过磷酸化参与染色质调控、RNA 加工与蛋白质稳态维持(proteostasis)的底物,影响转录程序和信号级联反应,从而将其与发育及应激反应通路联系起来。在人体生物学中,DYRK1A 的剂量与活性改变与神经发育表型以及对剂量敏感的基因网络相关;其信号输出的失衡也常在增殖与突触过程的研究背景下被探讨。这些特征使 DYRK1A 成为解析激酶依赖的基因表达调控与细胞命运决定机制时经常研究的关键节点。
Dyrk1A 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DYRK1A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DYRK1A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DYRK1A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DYRK1A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。