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Dynamin I双切口酶质粒(h) | sc-401183-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Dynamin I双切口酶质粒(h2) | sc-401183-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
DNM1 编码 Dynamin I(动力蛋白 I),这是一种在神经元中富集的大型 GTP 酶,在网格蛋白(clathrin)介导的内吞作用以及突触小泡回收过程中催化膜裂解。Dynamin I 通过 GTP 依赖性的寡聚化在出芽小泡的颈部聚集,并与内吞适配蛋白和肌动蛋白调控因子协同作用,以维持小泡运输、神经递质释放以及膜稳态。DNM1 的活性整合进调控突触传递、囊泡运输与膜重塑的通路,其功能扰动与神经发育异常和癫痫相关表型有关。与 DNM1 相关的内吞失调及突触小泡动力学异常,为研究神经元兴奋性、网络功能以及依赖运输过程的蛋白质稳态提供了机制切入点。
Dynamin I 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DNM1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DNM1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DNM1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DNM1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。