
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Dynactin p62双切口酶质粒(m) | sc-426674-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Dynactin p62双切口酶质粒(m2) | sc-426674-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Dctn4 编码 dynactin p62(动力连接蛋白复合体 p62),它是 dynactin(动力连接蛋白复合体)的一个亚基,支持细胞质动力蛋白(dynein)沿微管进行运输。Dynactin p62 参与货物结合并促进 dynein–dynactin 复合体的持续性运动,从而影响内体和溶酶体的定位、囊泡运输以及与自噬相关的货物处理。通过这些功能,Dctn4 影响神经元和免疫细胞的稳态,因为在这些细胞中,长距离运输与细胞器分布至关重要。Dynein–dynactin 通路组分的破坏普遍与神经退行性表型、蛋白质稳态异常以及炎症信号改变相关,因此 Dctn4 是用于研究基于微管运输缺陷机制的一个有价值节点。
Dynactin p62 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Dctn4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Dctn4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Dctn4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Dctn4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。