Date published: 2026-7-21

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Dynactin 5双切口酶质粒(m): sc-425606-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • Dynactin 5 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • Dynactin 5双切酶质粒(m)和Dynactin 5双切酶质粒(m2)编码针对Dctn5的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:Dynactin 5: sc-518204,通过WB, IF或者IHC分析
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    Dynactin 5双切口酶质粒(m)

    sc-425606-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    Dynactin 5双切口酶质粒(m2)

    sc-425606-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    Dctn5 编码 dynactin 5(动力蛋白激活复合体5),是 dynactin 复合体的一个亚基;该复合体与细胞质动力蛋白(dynein)协同作用,支持基于微管的逆向运输。通过调控货物适配蛋白的结合以及马达的持续运动活性,dynactin 5 参与囊泡和细胞器运输、内体–溶酶体动态过程,以及高尔基体与有丝分裂纺锤体的定位。这些功能使 Dctn5 处于调控细胞内运输、细胞分裂以及神经元和免疫细胞稳态等通路之中;在这些过程中,长距离运输往往是限制速率的关键环节。dynein–dynactin 组分的扰动与神经退行性病变、发育缺陷以及应激反应等研究密切相关,这些现象通常与轴突运输受损和蛋白稳态(proteostasis)失衡有关。

    Dynactin 5 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Dctn5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Dctn5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Dctn5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Dctn5基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。