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Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3双切口酶质粒(m) | sc-420082-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3双切口酶质粒(m2) | sc-420082-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Dvl3 编码 Dishevelled 3(Dvl-3),这是一种位于细胞质的磷酸化蛋白,在 Wnt 信号传导中充当核心支架。Dvl-3 将来自 Frizzled 受体的信号传递至下游效应分子,既参与经典的 β-连环蛋白依赖性转录通路,也参与非经典的平面细胞极性(PCP)通路和 Wnt/Ca²⁺ 通路,从而影响细胞极性、迁移以及细胞骨架重塑。通过这些网络,DVL3 参与胚胎图式建立与组织稳态维持;而 Wnt–Dishevelled 信号失调常与肿瘤相关信号、发育缺陷以及纤维化相关的重塑过程有关。因此,扰动 Dvl3 被广泛用于研究其与 GSK3β/β-连环蛋白、JNK 信号以及小 GTP 酶介导的肌动蛋白动态之间的通路串扰。
Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Dvl3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Dvl3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Dvl3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Dvl3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。