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DSC2双切口酶质粒(m) | sc-420063-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DSC2双切口酶质粒(m2) | sc-420063-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Dsc2 编码桥粒连接蛋白 2(desmocollin-2,DSC2),这是一种存在于桥粒中的钙依赖性钙黏蛋白,在上皮组织和心脏组织中介导强而稳定的细胞–细胞黏附。DSC2 与桥粒芯糖蛋白(desmogleins)、桥粒连环蛋白(plakoglobin)、桥粒斑蛋白(plakophilins)以及桥粒斑蛋白(desmoplakin)协同作用,将连接复合体与中间丝耦联,从而维持组织完整性并参与机械信号传导。通过参与桥粒装配与连接结构重塑,DSC2 影响上皮分化、屏障功能及应激反应,这些过程与细胞骨架和信号通路相互交织,例如由 PKC 和 Rho 家族 GTP 酶调控的连接动态。DSC2 表达或功能失调与黏附受损和组织脆弱等表型相关;在实验模型中,桥粒扰动也与心肌病及癌症相关的细胞黏聚变化有关。
DSC2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Dsc2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Dsc2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Dsc2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Dsc2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。