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DRP1双切口酶质粒(h) | sc-400459-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DRP1双切口酶质粒(h2) | sc-400459-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
DNM1L 编码动力蛋白相关蛋白 1(DRP1),这是一种大型 GTP 酶;它通过在 mitochondrial 外膜上组装,并与 FIS1、MFF 以及 MID49/51 等适配蛋白协同收缩膜结构,从而统筹线粒体分裂。通过调控线粒体网络的结构,DRP1 影响氧化磷酸化、活性氧(ROS)处理、线粒体 DNA 的分配,以及通过线粒体自噬(mitophagy)实现的细胞器质量控制。DRP1 依赖的动态变化与凋亡信号和代谢适应紧密耦联,使 DNM1L 的活性与调控细胞应激反应和生物能量稳态的通路相联系。DRP1 功能失调与线粒体碎片化与神经发育及神经退行性表型、心脏-代谢功能障碍以及癌细胞生存程序相关,因此 DNM1L 常被作为研究线粒体生物学机制的重点靶点。
DRP1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DNM1L 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DNM1L内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DNM1L的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DNM1L基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。