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Doublecortin双切口酶质粒(h) | sc-400033-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Doublecortin双切口酶质粒(h2) | sc-400033-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
DCX 编码 Doublecortin(双皮质蛋白),这是一种微管相关蛋白,能够结合并稳定微管,从而在脑发育过程中调控神经元迁移、神经突起生长以及大脑皮层分层形成。Doublecortin 协调细胞骨架重塑与中心体—细胞核耦联,并与塑造细胞极性和定向运动的微管动力学相整合。DCX 功能受损会扰乱径向迁移和神经元定位,致病变异与包括 X 连锁无脑回畸形(lissencephaly)和皮层下带状异位(subcortical band heterotopia)在内的神经发育畸形相关。作为未成熟神经元中的 DCX 标记物及功能调控因子,它被广泛用于研究神经发生机制、细胞骨架调控以及发育期神经环路组装。
Doublecortin/DCX 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DCX 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DCX内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DCX的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DCX基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。