Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
DOCK 8 Antibody (G-2) Alexa Fluor® 647: sc-376911 AF647. Direct fluorescent western blot analysis of DOCK 8 expression in THP-1 (A) and Raji (B) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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DOCK 8双切口酶质粒(h): sc-401727-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- DOCK 8 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- DOCK 8双切酶质粒（h）和DOCK 8双切酶质粒（h2）编码针对DOCK8的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：DOCK 8: sc-376911，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DOCK 8双切口酶质粒(h) | sc-401727-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
DOCK8 编码胞质分裂调控蛋白 8（dedicator of cytokinesis 8），是一种非典型的鸟嘌呤核苷酸交换因子，可调控 Rho 家族 GTP 酶，从而协调肌动蛋白细胞骨架重塑、细胞极性建立以及免疫受体下游的信号整合。DOCK8 促进淋巴细胞迁移、免疫突触形成与细胞存活，将细胞骨架动力学与黏附及囊泡运输相关通路连接起来。功能缺失变异会破坏造血细胞中的细胞骨架调控，并与原发性免疫缺陷表型相关，其特征包括抗病毒反应受损和免疫稳态失衡。作为连接受体输入与肌动蛋白依赖过程的信号枢纽，DOCK8 被广泛用于研究白细胞生物学、宿主—病原体相互作用以及免疫细胞发育。
DOCK 8 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 DOCK8 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DOCK8内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏DOCK8的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了DOCK8基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。