Dnmt3L CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-424871

概述

Dnmt3l 编码 Dnmt3L，这是一种没有催化活性的辅因子，可促进从头（de novo）DNA 甲基转移酶 DNMT3A 和 DNMT3B 在发育过程中建立并维持 DNA 甲基化模式。在小鼠中，Dnmt3L 与生殖系表观遗传编程密切相关：它支持对反转座子和印记控制区的甲基化，从而有助于维持基因组稳定性并实现亲本来源特异性的基因调控。通过这些功能，Dnmt3L 融入表观遗传调控通路，协调染色质状态、转录沉默以及与减数分裂相关的重编程。DNMT3L 相关甲基化过程的失调与印记缺陷、转座子抑制改变以及更广泛的表观基因组不稳定性有关，进而可能影响发育表型和与疾病相关的表观遗传状态。

Dnmt3L CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Dnmt3l基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Dnmt3l基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Dnmt3l开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Dnmt3L蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建Dnmt3l缺失的细胞模型，用于Dnmt3L信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 Dnmt3L 功能至关重要的 Dnmt3l 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 Dnmt3l 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 Dnmt3L CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Dnmt3L CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Dnmt3l 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 Dnmt3L HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Dnmt3L HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Dnmt3l同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Dnmt3l靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。