Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Dnmt2 Antibody (D-9): sc-365001. Western blot analysis of Dnmt2 expression in HeLa (A), K-562 (B) and HCT-116 (C) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgG1 BP-HRP: sc-525408.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Dnmt2双切口酶质粒(h): sc-402709-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Dnmt2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Dnmt2双切酶质粒（h）和Dnmt2双切酶质粒（h2）编码针对TRDMT1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Dnmt2: sc-365001，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Dnmt2双切口酶质粒(h) | sc-402709-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Dnmt2双切口酶质粒(h2) | sc-402709-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TRDMT1 编码 Dnmt2，这是一种在进化上高度保守的 RNA 胞嘧啶-5 甲基转移酶，主要修饰特定 tRNA（例如在 tRNA Asp-GTC 上形成 m5C），而非基因组 DNA。这种活性有助于维持 tRNA 稳定性、保证翻译保真度并促进细胞对压力的适应，从而将 TRDMT1 与 RNA 表观遗传调控及蛋白质稳态联系起来。Dnmt2 介导的 tRNA 甲基化还与小 RNA 生物发生的调控以及影响细胞存活与分化的应激反应通路相关。已有研究在多种癌症情境以及神经发育和代谢失衡模型中观察到 TRDMT1 功能或表达的改变，因此推动了针对 RNA 甲基化在疾病相关表型中作用机制的研究。
Dnmt2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 TRDMT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TRDMT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏TRDMT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了TRDMT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。