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DNase I双切口酶质粒(h) | sc-402467-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DNase I双切口酶质粒(h2) | sc-402467-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 DNASE1 基因编码 DNase I,这是一种分泌型内切核酸酶,可切割细胞外 DNA 以及与染色质相关的 DNA,从而促进核酸清除,并调控由自身 DNA 触发的炎症信号。DNase I 的活性会影响多种相关过程,包括与凋亡相关的 DNA 片段化、中性粒细胞胞外诱捕网(NET)的周转,以及通过 DNA 感知通路防止异常的先天免疫激活。DNASE1 的表达或活性发生改变与循环 DNA 清除受损及免疫失调有关,这些情境常在自身免疫和组织损伤模型中被研究。在肿瘤与基质生物学领域,DNase I 介导的 DNA 周转也被用于探讨其对肿瘤微环境及细胞外核酸信号传导的影响。
DNase I 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DNASE1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DNASE1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DNASE1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DNASE1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。