DNA Ligase I慢病毒激活颗粒(h): sc-402830-LAC

人类 LIG1 基因编码 DNA 连接酶 I（DNA Ligase I），这是一种 ATP 依赖性的连接酶，在滞后链 DNA 复制、冈崎片段处理以及长片段碱基切除修复过程中，通过催化磷酸二酯键的形成来封合 DNA 缺口。DNA 连接酶 I 在复制叉处发挥作用，并参与由 PCNA、RFC、FEN1 及多种聚合酶协调的 DNA 损伤应答网络，从而支持基因组稳定性与细胞周期的准确推进。LIG1 活性或表达的扰动与复制应激升高、链断裂累积以及突变负担增加相关，进而可能影响肿瘤发生及其他基因组不稳定表型。作为复制耦联修复的核心因子，LIG1 常用于研究调控 S 期检查点、染色质维持以及对氧化或烷基化损伤的应答等通路。

DNA Ligase I 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 LIG1 表达。

DNA Ligase I 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在LIG1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性DNA Ligase I表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 LIG1 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。